Carcinogenicidad del D-004 en ratas Srague Dawley: informe parcial a los 18 meses / Carcinogenicity of D-004 in Sprague Dawley rats: a partial report at 18 months

INTRODUCCIÓN. el D-004, extracto lipídico del fruto de Roystonea regia (palma real), constituido por una mezcla reproducible de ácidos grasos -principalmente oleico, palmítico, láurico y mirístico- ha mostrado ser efectivo en modelos experimentales de hiperplasia prostática. OBJETIVO. resumir los resultados parciales (18 meses) del estudio de carcinogenicidad por exposición repetida y prolongada del D-004 en ratas Sprague Dawley, el cual culminará al concluir el tiempo establecido (24 meses). MÉTODOS. ratas Sprague Dawley de uno y otro sexo fueron distribuidas aleatoriamente en cuatro grupos (50 ratas/sexo/grupo): uno control de vehículo y tres tratados con D-004 (500, 1000 y 1500 mg/kg, respectivamente). Los tratamientos se administraron oralmente por intubación gástrica. Este reporte incluye los resultados de peso corporal, observaciones clínicas, mortalidad y frecuencia de aparición de tumores hasta ese momento (18 meses). RESULTADOS. la frecuencia de mortalidad es baja: en los grupos tratados fue de un 8,3 % por un 9 % en los controles. No se evidencia una disminución en el tiempo de supervivencia y las observaciones diarias no revelaron signos indicativos de toxicidad atribuibles al tratamiento. Además, el momento de aparición de tumores y la frecuencia de estos en los animales tratados y en los controles fueron estadísticamente similares en ambos sexos. CONCLUSIONES. en conclusión, la administración oral de D-004 (500-1500 mg/kg) a las ratas no mostró, durante los primeros 18 meses del estudio, evidencias de toxicidad o carcinogenicidad temprana relacionadas con el tratamiento

INTRODUCTION: D-004, a lipid extract from royal palm (Roystonea regia) fruit constituted by a reproducible mixture of fatty acids, mainly oleic, palmitic, lauric and myristic, has shown to be effective in experimental models of prostate hyperplasia. OBJECTIVE: summarize the partial results (18 months) of the study on carcinogenicity by repeated and long-term exposure of Sprague Dawley rats to D-004, to be completed in the planned period of 24 months. METHODS: sprague Dawley rats of both sexes were randomly distributed into four groups (50 rats / sex / group): one group was the vehicle control and three were treated with D-004 (500, 1000 and 1500 mg/kg, respectively). Treatments were administered orally by gastric intubation. This report includes the results obtained so far (18 months) concerning body weight, clinical observations, mortality and frequency of appearance of tumors. RESULTS: mortality is low: 8.3% in treatment groups and 9% in controls. A reduction in survival time was not observed, and daily observations did not reveal any signs of toxicity attributable to the treatment. The time of appearance and the frequency of tumors in treated animals and controls were statistically similar in both sexes. CONCLUSIONS: oral administration of D-004 (500­1500 mg/kg) to rats during the first 18 months of the study did not show any evidence of early carcinogenicity or toxicity associated with the treatment.

Carcinogenicidad del D-004 en ratas Sprague Dawley. Reporte parcial a los 18 meses / Carcinogenicity of D-004 in Sprague Dawley rats. A partial report at 18 months

Introducción: el D-004, un extracto lipídico del fruto de la palma real, Roystonea regia, constituido por una mezcla reproducible de ácidos grasos, principalmente oleico, palmítico, láurico y mirístico, ha mostrado prevenir la hiperplasia prostática (HP) inducida con T en roedores y actúa mediante un mecanismo multifactorial que implica la inhibición de 5a-reductasa prostática, el antagonismo de las respuestas mediadas por los a1-ADR, efectos anti-inflamatorios y antioxidantes. Objetivo: el presente trabajo tiene como propósito resumir los resultados parciales (18 meses) del estudio de carcinogenicidad a largo plazo del D-004 en ratas, el cual culminará con el tiempo establecido de 24 meses. Métodos: se distribuyeron ratas Sprague Dawley (SD) de ambos sexos aleatoriamente, en cuatro grupos (50 ratas/sexo/grupo): un grupo como control de vehículo, y tres tratados con D-004 (500, 1 000 y 1 500 mg/kg, respectivamente). Los tratamientos se administraron por intubación gástrica. Este reporte incluye los resultados de peso corporal, observaciones clínicas, mortalidad y frecuencia de aparición de tumores hasta ese momento. Resultados: la frecuencia de mortalidad es baja, en los grupos tratados fue de un 8.3 por ciento por un 9 por ciento en los controles, no se evidencia disminución en el tiempo de supervivencia y las observaciones diarias no revelaron signos indicativos de toxicidad atribuibles al tratamiento. Además, el momento de aparición y la frecuencia de tumores en animales tratados y controles fueron estadísticamente similares en ambos sexos. Conclusiones: en conclusión, la administración de D-004 (5001500 mg/kg) a ratas durante los primeros 18 meses del estudio, no mostró evidencias de toxicidad o carcinogenicidad temprana relacionadas con el tratamiento

Introduction: D-004, a lipid extract from royal palm (Roystonea regia) fruit made up of a reproducible mixture of fatty acids, mainly oleic, palmitic, lauric and myristic, has shown to prevent prostate hyperplasia (PH) induced by T in rodents. It acts through a multifactorial mechanism involving prostatic 5a-reductase inhibition, antagonism of a1-ADR-mediated responses, and antiinflammatory and antioxidant effects. Objective: the paper is aimed at summarizing the partial results (18 months) of the long-term carcinogenicity study of D-004 in rats, which is set to conclude in the established 24-month period. Method: Sprague Dawley (SD) rats of both sexes were randomly distributed into four groups (50 rats/sex/group): one group as vehicle control and three treated with D-004 (500, 1 000 and 1 500 mg/kg, respectively). Treatments were administered by gastric intubation. This report presents the results obtained so far concerning body weight, clinical observations, mortality and frequency of appearance of tumors. Results: mortality rate is low: 8.3 percent in the treated groups and 9 percent among controls. No evidence was found of survival time reduction, and daily observations did not reveal any signs of toxicity attributable to the treatment. The time of appearance and the frequency of tumors in treated animals and controls were statistically similar in both sexes. Conclusions: administration of D-004 (5001 500 mg/kg) to rats during the first 18 months of the study did not show any evidence of early carcinogenicity or toxicity associated with the treatment

Efectos del D-003, mezcla de àcidos alifáticos en el ensayo de aberraciones cromosómicas in vivo / Effects of D-003, a mixture of aliphatic acids in a trial of in vivo chromosomal aberrations

El D-003 es una mezcla de àcidos alifàticos primarios de alto peso molecular purificada de la cera de caña de azúcar, cuyo componente principal es el àcido octacosanoico, con efectos antiosteoporóticos, hipolipemiantes y antioxidantes. El objetivo de este trabajo fue determinar si el tratamiento oral con D-003 durante 14 días induce aberraciones cromosómicas in vivo en médula ósea de ratones. Se formaron 5 grupos experimentales (5 ratones/grupo/sexo): un grupo control solvente, tres tratados con D-003 (500, 1 000 y 2 000 mg/kg) y un control positivo tratado con ciclofosfamida (50 mg/kg, ip), 24 h antes del sacrificio. El D-003 no aumentó la frecuencia de aparición de aberraciones (estructurales o numéricas) ni modificó el índice mitótico con respecto a los controles negativos, mientras que la ciclofosfamida, como era esperado sí aumentó ambas frecuencias. En conclusión, el D-003 no presentó potencial genotóxico ni citotóxico sobre las células de la médula ósea de ratones NMRI.

The D-003 is a mixture of high-molecular weight primary aliphatic acids purified from the sugar cane wax, whose main component is the octacosanic acid with antiosteoporotic, hypolipidemic and antioxidant effects. The aim of present paper was to determine if the oral treatment with D-003 for 14 days induces in vivo chromosomal aberrations in bone marrow of mice. Animals were randomized into 5 groups (5 mice/group/sex): one solvent control group, 3 D-003- treated with Ciclophosphamide (50 mg/kg), intraperitoneal route) 24 hours before sacrifice. D-003 neither increase the frequency of aberrations appearance (Structural or numerical) nor modified the mitotic index with regard to negative controls, whereas the cyclophosphamide increase both frequencies as expected. In conclusion, the D-003 has neither genotoxic potential nor cytotoxic on the bone marrow cells of NMRI mice.

Longitud del ciclo estral en ratas Sprague Dawley tratadas in útero con extracto de Roystonea regia / Estrus cycle length in Sprague Dawley rats in uterus using Roystonea regia extract

El D-004 consiste en una mezcla de ácidos grasos que inhibe significativamente la hiperplasia prostática inducida por testosterona en roedores. El objetivo del presente estudio fue evidenciar los posibles efectos adversos sobre el ciclo estral de hembras F1 expuestas in útero al D-004. Se utilizaron ratas Sprague Dawley, distribuidas aleatoriamente en 4 grupos: un control y 3 tratados con D-004 a las dosis de 500, 750 y 1 000 mg/kg; las hembras recibieron la administración de la dosis por vía oral desde 15 días antes del apareo y hasta el fin de la lactancia. A una hembra por camada de la generación F1 se le estudió la citología vaginal y se calculó la longitud aproximada del ciclo, la cual no se vio afectada ya que no existieron diferencias significativas (p= 0,1537) entre los grupos tratados y el control. Estos resultados indican que el D-004 no reveló alteraciones del ciclo estral de las crías hembras expuestas in útero(.

D-004 is a mix of fatty acids inhibiting significantly Testosterone- induced prostatic hyperplasia in rodents. The aim of present paper was to demonstrate the potential side effects on estrus cycle of F1 female rats exposed in uterus to D-004. We used Sprague Dawley rats, distributed randomly in 4 groups: a control one and another three treated with D-004 at a dosage of 500, 750 and 1 000 mg/kg; in the female rats we administered the dose by mouth from the 15 days before mating, and up to breast feeding termination. In each female rat by litter of F1 generation, the vaginal cytology was studied, and we estimated the approximate length of cycle, remained un-affected since there were not significant differences (p= 0,1537) among treatment groups and the control one. These results show that D-004 fails to reveals alterations in the estrum cycle of female litters exposed in uterus.

Evaluación genotóxica del D-004, extracto del fruto de Roystonea regia, mediante el ensayo de micronúcleos / Genotoxic assessment of D-004, extract from Roystonea regia fruit, by means of micronuclei assays

El D-004 es un extracto lipídico del fruto de la palma real (Roystonea regia), que ha demostrado ser eficaz en prevenir la hiperplasia prostßtica inducida por testosterona y por fenilefrina en modelos experimentales en ratas. El objetivo fue determinar si el D-004 induce cambios en la frecuencia de aparición de micronúcleos al realizar la administración oral a dosis repetida durante 8 semanas. Se formaron 5 grupos experimentales (7 animales/grupo): un grupo control solvente, tres tratados con D-004 (500, 1 000 y 1 500 mg/kg) y un control positivo tratado con ciclofosfamida. No ocurrieron muertes ni se detectaron signos clínicos de toxicidad. No hubo diferencias significativas entre controles y tratados en cuanto a la frecuencia de eritrocitos policromatófilos micronucleados y el índice de citotoxicidad. En conclusión, el D-004 administrado por vía oral a las dosis empleadas no presenta actividad clastogénica ni citotóxica en médula ósea de ratones OF-1 machos in vivo.

D-004 is a lipid extract from the real palm fruit (Roystonea regia), which has demonstrated that is effective to prevent prostatic hyperplasia from testosterone and from phenylephrine in rats' experimental models. Aim of this paper was to determine if D-004 provoke changes in appearance frequency of micronuclei during oral administration of repeated doses for 8 weeks. Five experimental groups were created (7animals/group): a solvent control-group, three treated with D-004(500, 1 000, and 1 500 mg/kg), and a positive control-group treated with cyclophosphamide. There were no deaths or clinical signs of toxicity neither significant differences among controls and treated ones as regards the frequency of micronucleated polychromatophils erythrocytes, and the cytotoxic index. In conclusion, D-004 administered per os at doses used has neither clastogenic nor cytotoxic activity in bone marrow male OF-1mice in vivo.